酵母双杂交技术原理和步骤
女人花
精选回答
酵母双杂交法的原理:
典型的真核生物转录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域和转录激活结构域
前者可识别DNA上的特异序列, 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游, 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用, 启动它所调节的基因的转录。
步骤:
1. 阳性克隆的筛选
2. 用质粒自然分选法筛除只含有AD-文库杂合子的克隆
3. 酵母杂合试验确定真阳性克隆
4. 阳性克隆的进一步筛选和确证
5. 对双杂交系统阳性结果的进一步研究
是梦终醒 2023-08-29 15:47:57
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